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  1. 0 資料タイプ別
  2. 03 紀要論文
  1. 070 農学部
  2. 20 紀要
  3. 01 新潟大学農学部研究報告
  4. 第60巻第1号

Loading of Fura-2 into Liquid Organ Cultured Adventitious Root of Turnip (Brassica rapa L.) Resistant to Clubroot Pathogen Plasmodiophora brassicae and Determination of [Ca2+]cyt

http://hdl.handle.net/10191/5039
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7e4b6583-7676-4ebd-97e8-c7256e157189
名前 / ファイル ライセンス アクション
1_0009.pdf 1_0009.pdf (208.1 kB)
Item type 紀要論文 / Departmental Bulletin Paper(1)
公開日 2007-10-12
タイトル
タイトル Loading of Fura-2 into Liquid Organ Cultured Adventitious Root of Turnip (Brassica rapa L.) Resistant to Clubroot Pathogen Plasmodiophora brassicae and Determination of [Ca2+]cyt
タイトル
言語 en
タイトル Loading of Fura-2 into Liquid Organ Cultured Adventitious Root of Turnip (Brassica rapa L.) Resistant to Clubroot Pathogen Plasmodiophora brassicae and Determination of [Ca2+]cyt
言語
言語 eng
キーワード
主題Scheme Other
主題 Brassica rapa
キーワード
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主題 clubroot resistance
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主題 cytosolic [Ca2+]
キーワード
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主題 Fura-2
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主題 Brassica rapa
キーワード
主題Scheme Other
主題 Fura-2
キーワード
主題Scheme Other
主題 細胞内Ca2+ 濃度
キーワード
主題Scheme Other
主題 根こぶ病抵抗性
キーワード
主題Scheme Other
主題 培養根
資源タイプ
資源 http://purl.org/coar/resource_type/c_6501
タイプ departmental bulletin paper
その他のタイトル
その他のタイトル 根こぶ病抵抗性カブ(Brassica rapa L.)培養根へのFura-2の導入と細胞内Ca2+ 濃度の測定
著者 Takahashi, Hideyuki

× Takahashi, Hideyuki

WEKO 163519

Takahashi, Hideyuki

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Ishikawa, Toshiki

× Ishikawa, Toshiki

WEKO 163520

Ishikawa, Toshiki

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Hayakawa, Tohru

× Hayakawa, Tohru

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Hayakawa, Tohru

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Itoh, Kimiko

× Itoh, Kimiko

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Itoh, Kimiko

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Mitsui, Toshiaki

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Mitsui, Toshiaki

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Hori, Hidetaka

× Hori, Hidetaka

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Hori, Hidetaka

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著者別名
識別子 163525
識別子Scheme WEKO
姓名 高橋, 秀行
著者別名
識別子 163526
識別子Scheme WEKO
姓名 石川, 寿樹
著者別名
識別子 163527
識別子Scheme WEKO
姓名 早川, 徹
著者別名
識別子 163528
識別子Scheme WEKO
姓名 伊藤, 紀美子
著者別名
識別子 163529
識別子Scheme WEKO
姓名 三ツ井, 敏明
著者別名
識別子 163530
識別子Scheme WEKO
姓名 堀, 秀隆
抄録
内容記述タイプ Abstract
内容記述 Our previous study using liquid organ cultured adventitious roots from turnip (Brassica rapa L.) showed that Ca2+ is required for induction of defense responses in the cultured roots on the treatment with Plasmodiophora brassicae resting spores (Takahashi et al., 2006). To evaluate change in [Ca2+]cyt in cultured root cells on contact with the spores, acetoxymethyl ester derivative of Fura-2 (Fura-2/AM) was loaded into the roots. When ionophore A23187 was treated with Ca2+ simultaneously, the Fura-2 fluorescence ratio that represents relative [Ca2+]cyt increased promptly, showing that the Fura-2/AM system is suitable to evaluate [Ca2+]cyt change in cultured root cells in a second range. Applicability of this method for studies on Ca2+ fluctuation against various extracellular stimuli was supported by observations that treatment with mannitol or NaCl also immediately increased the Fura-2 ratio. When the Fura-2/AM loaded roots were treated with resting spores, no [Ca2+]cyt change was observed during 500 second but when treated with spores pre-incubated with germination-enhancing suspension (GES), a slight but reproducible increase in [Ca2+]cyt was observed. We conclude that although further analysis is needed, the Fura-2/AM system will contribute to revealing the Ca2+ involvement in clubroot-resistance response. 我々は以前の研究において、カブ(Brassica rapa L.)幼根から誘導した培養根を用い、根こぶ病菌Plasmodiophora brassicaeに対する初期抵抗反応の誘導にCa2+ が必要であることを示した(Takahashi et al., 2006)。本研究では、根こぶ病抵抗反応におけるカブ培養根の細胞内Ca2+ 濃度([Ca2+]cyt)の変動を調査するため、Ca2+ の蛍光指示薬Fura-2のアセトキシメチルエステル(Fura-2/AM)をカブ培養根に導入し、蛍光顕微鏡により[Ca2+]cyt を定量的に解析することを試みた。蛍光顕微鏡下で細胞質内にFura-2が導入されたことが確認できたカブ培養根に、カルシウムイオノフォアA23187とCa2+ を同時に処理すると、直ちに[Ca2+]cyt の相対値を示すFura-2蛍光比が上昇したことから、Fura-2/AM を用いた本手法は、培養根における[Ca2+]cyt の変化を観察するのに適していることが示された。さらに[Ca2+]cyt を増加させることが知られている外的刺激として、マンニトール及びNaCl の高濃度処理を行ったところ、同様なFura-2蛍光比の急激な増加が観察され、本手法の汎用性が示された。次に、我々は本来の目的である根こぶ病抵抗反応における[Ca2+]cyt の解析に本手法を応用した。Fura-2/AM を導入した根こぶ病抵抗性カブ培養根にP. brassicae の休眠胞子を処理しても、500秒の測定時間内に[Ca2+]cyt が変化することは無かった。しかし休眠胞子を発芽促進液(GES: germination enhancing suspension)で前処理し、同様の実験を行ったところ、非常にわずかであったものの、再現性ある[Ca2+]cyt の上昇が観察された。根こぶ病に対する初期抵抗反応におけるCa2+ の重要性を立証するためには、今後さらなる解析が必要であるが、その過程において本手法は大きく貢献するものと期待される。
書誌情報 新潟大学農学部研究報告
en : 新潟大学農学部研究報告

巻 60, 号 1, p. 61-66, 発行日 2007-08
出版者
出版者 新潟大学農学部
ISSN
収録物識別子タイプ ISSN
収録物識別子 03858634
書誌レコードID
収録物識別子タイプ NCID
収録物識別子 AN00183393
著者版フラグ
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Ver.1 2021-03-01 11:00:52.801839
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