WEKO3
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Loading of Fura-2 into Liquid Organ Cultured Adventitious Root of Turnip (Brassica rapa L.) Resistant to Clubroot Pathogen Plasmodiophora brassicae and Determination of [Ca2+]cyt
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名前 / ファイル | ライセンス | アクション |
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Item type | 紀要論文 / Departmental Bulletin Paper(1) | |||||
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公開日 | 2007-10-12 | |||||
タイトル | ||||||
タイトル | Loading of Fura-2 into Liquid Organ Cultured Adventitious Root of Turnip (Brassica rapa L.) Resistant to Clubroot Pathogen Plasmodiophora brassicae and Determination of [Ca2+]cyt | |||||
タイトル | ||||||
言語 | en | |||||
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言語 | ||||||
言語 | eng | |||||
キーワード | ||||||
主題Scheme | Other | |||||
主題 | Brassica rapa | |||||
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主題 | clubroot resistance | |||||
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主題 | Brassica rapa | |||||
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主題 | Fura-2 | |||||
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主題Scheme | Other | |||||
主題 | 細胞内Ca2+ 濃度 | |||||
キーワード | ||||||
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主題 | 根こぶ病抵抗性 | |||||
キーワード | ||||||
主題Scheme | Other | |||||
主題 | 培養根 | |||||
資源タイプ | ||||||
資源 | http://purl.org/coar/resource_type/c_6501 | |||||
タイプ | departmental bulletin paper | |||||
その他のタイトル | ||||||
その他のタイトル | 根こぶ病抵抗性カブ(Brassica rapa L.)培養根へのFura-2の導入と細胞内Ca2+ 濃度の測定 | |||||
著者 |
Takahashi, Hideyuki
× Takahashi, Hideyuki× Ishikawa, Toshiki× Hayakawa, Tohru× Itoh, Kimiko× Mitsui, Toshiaki× Hori, Hidetaka |
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著者別名 | ||||||
識別子 | 163525 | |||||
識別子Scheme | WEKO | |||||
姓名 | 高橋, 秀行 | |||||
著者別名 | ||||||
識別子 | 163526 | |||||
識別子Scheme | WEKO | |||||
姓名 | 石川, 寿樹 | |||||
著者別名 | ||||||
識別子 | 163527 | |||||
識別子Scheme | WEKO | |||||
姓名 | 早川, 徹 | |||||
著者別名 | ||||||
識別子 | 163528 | |||||
識別子Scheme | WEKO | |||||
姓名 | 伊藤, 紀美子 | |||||
著者別名 | ||||||
識別子 | 163529 | |||||
識別子Scheme | WEKO | |||||
姓名 | 三ツ井, 敏明 | |||||
著者別名 | ||||||
識別子 | 163530 | |||||
識別子Scheme | WEKO | |||||
姓名 | 堀, 秀隆 | |||||
抄録 | ||||||
内容記述タイプ | Abstract | |||||
内容記述 | Our previous study using liquid organ cultured adventitious roots from turnip (Brassica rapa L.) showed that Ca2+ is required for induction of defense responses in the cultured roots on the treatment with Plasmodiophora brassicae resting spores (Takahashi et al., 2006). To evaluate change in [Ca2+]cyt in cultured root cells on contact with the spores, acetoxymethyl ester derivative of Fura-2 (Fura-2/AM) was loaded into the roots. When ionophore A23187 was treated with Ca2+ simultaneously, the Fura-2 fluorescence ratio that represents relative [Ca2+]cyt increased promptly, showing that the Fura-2/AM system is suitable to evaluate [Ca2+]cyt change in cultured root cells in a second range. Applicability of this method for studies on Ca2+ fluctuation against various extracellular stimuli was supported by observations that treatment with mannitol or NaCl also immediately increased the Fura-2 ratio. When the Fura-2/AM loaded roots were treated with resting spores, no [Ca2+]cyt change was observed during 500 second but when treated with spores pre-incubated with germination-enhancing suspension (GES), a slight but reproducible increase in [Ca2+]cyt was observed. We conclude that although further analysis is needed, the Fura-2/AM system will contribute to revealing the Ca2+ involvement in clubroot-resistance response. 我々は以前の研究において、カブ(Brassica rapa L.)幼根から誘導した培養根を用い、根こぶ病菌Plasmodiophora brassicaeに対する初期抵抗反応の誘導にCa2+ が必要であることを示した(Takahashi et al., 2006)。本研究では、根こぶ病抵抗反応におけるカブ培養根の細胞内Ca2+ 濃度([Ca2+]cyt)の変動を調査するため、Ca2+ の蛍光指示薬Fura-2のアセトキシメチルエステル(Fura-2/AM)をカブ培養根に導入し、蛍光顕微鏡により[Ca2+]cyt を定量的に解析することを試みた。蛍光顕微鏡下で細胞質内にFura-2が導入されたことが確認できたカブ培養根に、カルシウムイオノフォアA23187とCa2+ を同時に処理すると、直ちに[Ca2+]cyt の相対値を示すFura-2蛍光比が上昇したことから、Fura-2/AM を用いた本手法は、培養根における[Ca2+]cyt の変化を観察するのに適していることが示された。さらに[Ca2+]cyt を増加させることが知られている外的刺激として、マンニトール及びNaCl の高濃度処理を行ったところ、同様なFura-2蛍光比の急激な増加が観察され、本手法の汎用性が示された。次に、我々は本来の目的である根こぶ病抵抗反応における[Ca2+]cyt の解析に本手法を応用した。Fura-2/AM を導入した根こぶ病抵抗性カブ培養根にP. brassicae の休眠胞子を処理しても、500秒の測定時間内に[Ca2+]cyt が変化することは無かった。しかし休眠胞子を発芽促進液(GES: germination enhancing suspension)で前処理し、同様の実験を行ったところ、非常にわずかであったものの、再現性ある[Ca2+]cyt の上昇が観察された。根こぶ病に対する初期抵抗反応におけるCa2+ の重要性を立証するためには、今後さらなる解析が必要であるが、その過程において本手法は大きく貢献するものと期待される。 | |||||
書誌情報 |
新潟大学農学部研究報告 en : 新潟大学農学部研究報告 巻 60, 号 1, p. 61-66, 発行日 2007-08 |
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出版者 | ||||||
出版者 | 新潟大学農学部 | |||||
ISSN | ||||||
収録物識別子タイプ | ISSN | |||||
収録物識別子 | 03858634 | |||||
書誌レコードID | ||||||
収録物識別子タイプ | NCID | |||||
収録物識別子 | AN00183393 | |||||
著者版フラグ | ||||||
値 | publisher |